如何鉴别耳蜗基底膜从底到顶毛细胞

目的探讨大鼠耳蜗基底膜从底到頂毛细胞活性鉴别的实验观察方法方法采用丫啶橙-碘化丙啶(acri-dine orange-propidiumiodide,AO/PI)双染色法,荧光显微镜观察,检测经组织培养后新生大鼠耳蜗基底膜从底到顶毛細胞的活性。结果在激发光下  (本文共3页)

扁平苔藓 (orallichenplanus,OLP)是一种原因不明慢性浅在性炎症的角化性病变它可以单独发...  (本文共2页)

显示基底膜方法的比较古德全,粟永萍阎国和(重庆第三军医大学防原医学教研室,重庆630038)显示基底...  (本文共2页)

AA_3是一种新的抗人羊膜抗体,它可与各种来源于外胚层的表皮基底膜发生反应本文作者应用间接免疫荧光法,以AA_3抗体对9例交界型夶疱性表皮松解症(EB)病人(包括致死型的新生儿3例、“未定类”儿童2例、非致死型但病情严重...  (本文共1页)

耳蜗如何分析声音的经典理论主要来源於GeorgVon Békésy的工作成就。主要有三点:第一,声波频率与耳蜗基底膜从底到顶部位之间有一定的关系高频在蜗底引起最大的反应,随频率降低最大反应部位逐渐移向蜗顶。第二,上...  (本文共3页)

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卡那霉素对乙酰胆碱调节耳蜗外毛细胞的影响研究.pdf

卡那霉素对乙酰胆碱调节耳蜗外毛细胞的影响
卡那霉素对乙酰胆碱调节耳蜗外毛细胞的影响实验方法目的·中文论著摘要·珹是广泛使用的抗生素品种之一,但存在耳毒性、肾毒性等副作用研究证实,损害内耳感受器,引起听觉和前庭功能障碍,因此限制了这类抗苼素的临床应用。在众多实验研究中发现,对哺乳动物耳蜗外毛细胞的损伤最为明显饕J苣诓嚅祥鲜传出神经支配,传出神经末梢与纬赏淮チ櫻渲饕I窬葜饰R阴5?。已知这种传出神经支配对牡骺刈饔弥饕J潜;て洳皇芡饨绯可舸碳ぁD壳把芯勘砻饕阴5?特征,同源表达的的受体能够被氨基甙类抗生素非竞争性阻断,因此推断这类药与受体的正常结合,从而减弱了传出神经系统的保护作用,使外毛细胞受到损伤本研究通过建立卡那霉素豚鼠耳毒模型,采用电生理学方法记录听觉脑干反将豚鼠随机分为椋孩俣哉兆棰诳敲顾馗天组③卡那霉素给药熳椋组弧6哉兆槊客∪庾⑸渖硌嗡.痥豢敲顾刈槊咳占∪庾⑸淇敲素痥C咳詹饬刻逯匾缘髡┝俊氨基甙类抗生素,受体是由和腔槌傻木酆衔铮哂谢旌系腘、芴迕舾行缘囊├物的耳毒性作用在某些方面可能是由于其与乙酰胆碱受体结合,阻碍了乙酰胆碱应兄挡⒔岷闲翁А⑾赴Х椒ǎ鄄炜敲顾囟噪嗍筇豕δ芤约耙酰胆碱调节豚鼠耳蜗外毛细胞的影响,进而间接证明卡那霉素耳毒作用的机制与耳蜗鹘谝斐5南喙匦浴⑹笛槎锓肿榧岸灸P椭票选用耳廓反射灵敏的健康白色红目豚鼠只,雌雄不拘,体重约为克。阈值检测各组豚鼠于用药前及停药后旆直鸩馐訟使用听觉脑干反应系统,测试
结果用药前各组豚阈值无显著性差异覱.挥靡┖罂敲顾馗天组所有数据均以均数±标准差坛硎荆胑软件进行煅椤强度由J迹鸬档菁酰信卸弦訟的波为准。⒍匣啄て唐跛嵋旧?觳馔饷赴将各组豚鼠断头取听泡,暴露耳蜗,从蜗尖向蜗内轻轻推注%的液糜.溶液中袅笏矗%多聚甲醛溶液固定以上,同时在日咣下曝光.,然后在解剖显微镜下分离基底膜,置于载玻片上,用甘油盖玻片封片镜检,观察各组外毛细胞分布及形态学特点⒚庖咦榛觳舛弦阴5?鐺ッ珹表达各组豚鼠停药并测试完螅⒓炊贤反λ溃偃√荩潭ā⑼迅坪笮惺蜡包埋,平行蜗轴连续切片,将各组切片进行免疫组织化学染色,阴性對照组用嬉豢梗渌槐洹<觳馐保衅糜谙晕⒕迪拢空徘衅】碌偈器作为视野,数码相机拍照,用显微图像分析系统测定各组阳性反应的平均灰度值。灰度值越小,表示阳性反应越强⑼饷赴募毙苑掷将豚鼠迅速断头处死,取出两侧听泡,在人工外淋巴液中打开听泡,剔除耳蜗骨壳,切下二至顶轉耳蜗,放入含有ヒ鹊鞍酌傅奈薷迫薎淋巴液中,温度为.℃,消化弃去酶液,人工外淋巴液反复冲洗三次以终止消化。用细口径吸管反复吹打至细胞离散,将悍湃吮或置室温保存⒂ü獠飧选择分离活性好的匆韵路肿榻惺笛椋孩俣哉兆椤ⅱ贏组、③卡那霉素组。褐屑尤隖/避光孵育孟晕⒂ü獠飧葡低臣钡.ü馇慷鹊谋浠Sü馔枷蠹锹加诩扑慊校门涮兹砑治鲇ü馇慷缺化,荧光强度表示游离钙浓度的高低。⑼臣品治觯兄滴廾飨员浠屍.豢敲顾馗天组兄瞪呙飨裕攵哉兆阈值检测
结关键词论相比有显著性差异耳蜗基底膜从底到顶铺片显示:对照组耳蜗外毛细胞呈三排,分布均匀,无明显缺失;卡那霉素给药熳橥饷赴杂屑跎伲攵哉兆橄啾炔钜觳幻飨裕豢敲顾馗正常对照组耳蜗柯蒂氏器呈弱阳性表达,卡那霉素给药熳鍈粜反应产物的平均灰度值比对照组有所减少,卡那霉素给药熳锳粜苑从Σ物的平均灰度值与卡那霉素给药熳橄啾缺乓徊郊跎伲是垦粜员泶铩⒌ダ胪饷赴男翁卣骷案瞥上倒置显微镜下可见正常活性良好的适怨苎赴す饣暾ぶ芪有明显光晕,细胞核位于底部,细胞底部可见残存突触结构,表皮板上可见纤毛。钙荧光成像伪彩图形态与光镜下所见相同,细胞核内钙荧光强度高于胞浆,细胞底部荧光强度高于顶部⑼饷赴贑ǘ缺浠榭对照组和人工外淋巴液不加入保琌内荧光强度基本不变。加入驝ü馇慷戎祷郝撸后达到峰值。镺荧光强度峰值平均上升幅度为.倍敲顾镺内熒光强度峰值平均上升幅度为.倍阶椋煅橛邢灾畋尸.=峁砻骺敲碈ǘ壬叩姆取⒖敲顾乜缮唠嗍驛阈值;导致外毛细胞损伤。⒖敲顾乜梢鸲弦阴5?铛ッ副泶镌龈摺⒖敲顾乜山档虯升高外毛细胞内浓度的幅度。外毛细胞;卡那霉素;耳毒性;乙酰胆碱:⑼饷赴母谋药熳橥饷赴笔飨尸.㈦嗍蠖螦谋澩素能明显抑制餙◆匕:口
琸·英文论著摘要·.:①踜甌珹.瓾,琧瑆/,甋甌琣甀⑽鰐痥.
.瓵..甇甌.妒..琣.、Ⅳ琤羇甀瑃餫..:士.,—,瓼產.甪.十
论文作者签名:熹啦ㄖ期:芮论文作者签名:壶墨车指导教师签名:乏壹遂期:型互:三:中国医科大学研究生学位论文独创性声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的哃志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任本人唍全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,發表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学学校有权保留并向国家囿关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,以采用影印、缩印或其怹手段保存论文日 内容来自淘豆网转载请标明出处.

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