心肌损伤标志物三项检验的实验方案?

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【关键词】  心肌损伤标志物三项 實验室诊断 临床应用 研究进展

急性心肌梗死(AMI)是临床常见的急性心血管疾病,严重危害人们的生命健康对AMI的诊断研究一直备受医学界关注。AMI患者中约1/4早期没有典型的临床症状,约50.0%没有特异的心电图改变,因此心肌标志物的实验室检测在AMI的诊断中就有了相当重要的地位但AMI患者病情進展急而实验室检测时间长以及无特异性的指标一直是困扰我们的问题,经过数十年的研究探讨心肌标志物的实验室检测在项目组合、實验方法、检测时间上都有了重大突破,本文对其研究进展及临床应用情况做一综述

  AMI生化标志物的研究早期集中于血清酶标志物。AMI血清酶标志物的研究始于1954年,Karman等运用较为敏感的纸色谱法定量,测定 AMI患者血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,AMI患者血清AST升高,成为AMI的第一个血清酶标志粅血清AST有两种受不同基因控制的同工酶,分别存在于细胞质(c-AST)和线粒体(m-AST)内。AST升高有临床意义;后来发展到同时检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB);AST、CK、CK-MB成为传统的诊断AMI的血清标志物但其特异性不高,某些疾病可导致假阳性,如肝脏疾病、心肌疾病、心肌炎、骨骼肌创伤、肺动脉栓塞、休克及糖尿病均可影响其特异性

  2 心肌组织损伤及坏死标志物

  以往对于心肌梗死生化诊断指标主要是AST、LDH、α-HBDH、CK、CK-MB活性等酶学指標,那么在多年的实验过程中得出:AST、 LDH、α-HBDH、CK等因灵敏度和特异性都相对较差所以在心肌损伤的诊断中逐渐应用减少或已不再应用。近姩来研究认为心肌肌钙蛋白CTnI或 CTnT、CK-MB和肌红蛋白(MB)是心肌的3种特异性蛋白成分对心肌损伤有高度的特异性和敏感性,肌钙蛋白由3个亚单位组成它们各自有独立的结构和不同的调节作用,心肌肌钙蛋白在钙离子参与下调节介导肌动蛋白和肌球蛋白之间的相互反应从而维持心肌嘚舒张与收缩。在心肌细胞膜完整时心肌肌钙蛋白不会透出细胞膜进入血液循环,只有当心肌细胞膜破坏时肌钙蛋白才能释放入血。其血循环中肌钙蛋白的浓度与心肌受损的程序呈正比且具有长达15天的半衰期,是回顾性检测的最佳指标

  CK为细胞内重要的能量代谢酶,分布广泛以肌细胞中最多,由两个亚基组成二聚体;CK-MB主要存在于心肌细胞的外浆层一直是临床诊断心肌损伤的心肌酶谱中最具特异性的酶,但长期以来用免疫抑制法测定酶活性的干扰因素很多检测的敏感性、特异性均大受影响,现由美国心脏病协会和欧洲心脏病协會推荐用化学发光方法测定CK-MB的质量可不受酶活性的影响直接检测CK-MB分子的浓度,可更加敏感、特异地为临床提供帮助

  肌红蛋白主要存于横纹肌(心肌、骨骼肌)细胞中,在细胞膜的氧化功能中具有重要作用因其为小分子物质(相对分子质量 17000~18000),当心肌细胞发生损伤时Mb是朂早进入血液的生物标志物,其扩散入血的速度比CK-MB mass或cTnI/cTnT更快但因肌红蛋白在骨骼肌中也有表达,故骨骼肌损伤时也可有大量肌红蛋白释放其不具有心肌特异性。

  美国纽约心脏病协会的建议认为肌红蛋白是用于心肌损伤的最佳早期标志物。由于其为小分子物质在急性心肌梗死(AMI)时可快速入血,故在 AMI发生的1.5~6h内通过动态检测二次血清肌红蛋白水平可早期诊断是否有急性心肌梗死发生。如第二次检测值奣显高于第一次检测值则具有极高的阳性预报价值;如动态检测二次测定值间无差异,则具有100%的阴性预报价值排除急性心肌梗死的可能性。但应注意的是严重休克、严重的广泛性创伤、终末期肾功能不全、心肌炎、急性感染、肌炎或肌病时肌红蛋白均可能升高。因而应紸意与急性心肌梗死进行鉴别诊断由于肌红蛋白的窗口时间最短,仅为3~4天故在疾病发生后该指标不能用于回顾性分析。

  cTnI/cTnT被美国囷欧洲心脏病协会一致评为是诊断急性心肌梗死的高特异性和高敏感性的确诊标志物在心肌细胞损伤早期,游离于胞浆内的 cTnI/cTnT快速释放出來血清/血浆中水平在4~6h升高。随着肌原纤维不断崩解破坏以固定形式存在的cTn不断释放,血清/血浆中cTn水平在AMI发生后8~14h达高峰1~2周后降臸正常。由于cTnI/cTnT具有心肌特异性胸痛发生4h后的患者,可直接采用cTnI/cTnT检测其血清/血浆中水平升高具有诊断的特异性,AMI的早期诊断可为患者的治疗赢得宝贵时间对于一直不能通过心电图改变,又无临床典型症状的微小心肌损伤患者cTnI/cTnT的检测是目前的最佳辅助诊断指标。cTnI/cTnT 除了用於AMI的早期诊断外尚可作为临床溶栓治疗后再灌注的监测指标。CK-MB mass检测的敏感性和特异性都大大高于CK-MB活性(activity)故当没有开展cTnI或cTnT检测时,可用CK-MB mass协助临床诊断其对于诊断急性冠脉综合征和评价心肌损伤程度以及在敏感性和特异性方面都接近肌钙蛋白。

  3 心脏功能标志物的检测

  各种心脏疾病最终均可发展到心力衰竭由美国和欧洲心脏病协会推荐使用的B型尿钠肽(B-type brain natriuretic peptide,B-BNP)是目前最好的用于评价心力衰竭的实验室检測指标。B型尿钠肽又称脑尿钠肽(Brain natriuretic peptideBNP),是由心肌细胞合成的具有生物学活性的天然激素主要在心室表达,同时也存在于脑组织中当左心室功能不全时,由于心肌扩张而快速合成释放入血有助于调节心脏功能。心肌细胞所分泌的BNP先以108个氨基酸组成的前体形式存在当心肌細胞受到刺激时,在活化酶的作用下裂解为由 76个氨基酸组成的无活性的直线多肽和32个氨基酸组成的活性环状多肽释放入血循环,分别被稱为NT-proBNP和BNP

 NT-proBNP的生物学半衰期为60~120min,而BNP仅为20minB-BNP的释放与心衰程度密切相关,心衰程度加重B- BNP的释放增加。B-BNP的主要生物学作用是参与钠调节促进尿钠排泄和利尿,扩张血管维持血压的动态平衡,同时拮抗肾素-血管紧张素-醛固酮系统使心输出量增加现已发表的研究资料显示,B-BNP水平与左心室射血分数有极好的负相关性认为B-BNP可作为左心室射血分数的替代检测指标。

  现有不同公司的检测方法问世主要分为檢测外周血中NT-proBNP水平,或检测BNP水平无论是检测NT-proBNP还是BNP,在临床应用价值上都没有太大差异由于正常人血清/血浆B-BNP水平极低,故B-BNP水平的升高具囿极好的诊断价值B-BNP主要用于诊断心力衰竭、监测病程进展、对疗效和预后进行评估,同时用于AMI患者在治疗后对其心室功能的恢复状况进荇评估当治疗有效时,BNP水平可明显下降BNP水平的持续升高或持续不降低,通常提示患者的心衰未得到纠正或正进一步加重;在急诊室对呼吸急促患者的鉴别诊断也可通过测定B-BNP水平准确筛选出非心衰患者引起的呼吸困难,由于其所具有的心肌特异性B-BNP水平测定就具有很高的陰性预测价值;BNP在用于心脏外科手术患者的术前心脏功能评价,也是一项非常重要的指标国外许多研究也显示,B-BNP用于对高危人群的筛查具有重要的指导意义,如糖尿病、遗传性心脏病、高血压、既往心梗、风湿性心脏病已行换瓣手术患者都应定期作B-BNP的检测,及时了解心髒功能状况还有研究提示,B-BNP水平升高与高危患者的死亡率增加和再次住院治疗的风险均呈高度相关并认为B-BNP检测值比左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和VO2峰值更具有预测价值由于B-BNP是目前唯一最好的评价心衰的实验室检测指标,其检测快速、敏感、特异

  4 心肌血管炎症疾病标志物的检測

  近年来C反应蛋白(CRP)在国内外被作为炎症的标志物以广泛应用于心血管疾病中并深受重视,因为研究发现动脉血栓的形成除了脂肪积累嘚过程外还是一个炎症的发展过程,所以说C反应蛋白是动脉硬化、血栓形成疾病的较好标志物冠心病和动脉粥样硬化是一类严重危害囚类健康、影响生活质量的常见心血管疾病,用于评价冠心病危险因素的指标很多近几年,随着检测技术的发展一些新的检测指标也鼡于临床,其中最具代表性的指标为超敏CRP(hs-CRP)CRP由肝细胞合成(相对分子质量为100000~144000),正常情况下在血清/血浆中含量极低而当炎症或组织损伤时CRP含量可成倍增加,被临床作为炎症及感染的最佳实验室指标而hs-CRP水平用一般的免疫化学方法不能检测到,只能用超敏乳胶增强散射比浊法財能准确测定血浆中hs-CRP的浓度国外学者研究发现,健康人血清/血浆中hs-CRP水平<0.55mg/L当有心血管疾病危险性者,其hs-CRP水平往往>2.1mg/L因此,欧美等发达国镓已将hs-CRP作为预防心血管疾病的相对独立的一个新的筛查指标大量的数据分析显示,当hs-CRP低于2mg/L时发生心血管疾病的危险性很低,而当hs-CRP>2.1mg/L时發生心血管疾病的危险性增加。随着hs-CRP水平的进一步升高发生冠脉综合征或心肌梗死的危险因素显著升高,如将hs-CRP与总胆固醇和HDL浓度的比率聯合应用评价高危人群患冠心病的危险因素更具有客观的应用价值。因此hs-CRP主要用于冠心病危险因素的筛查。但切记应全面评价冠心病嘚危险因素不能将危险因素当作诊断指标。

  生物芯片是最新发展的新技术其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。目前可汾基因芯片、蛋白质芯片和细胞芯片他们具有高灵敏度、分析时间短等优点。目前国内正在研发用于测定肿瘤标志、肝炎标志和心肌标誌等生物芯片系统不久将来芯片式的POCT(即时检验--point of care testing)仪逐步应用到各个领域。

  总之传统的心肌酶学指标已经不能满足准确、快速的诊断囷指导治疗,心肌标志物的正确选择有助于临床对心脑血管疾病的及时诊断,避免漏诊和误诊利于早期有效的治疗,减少并发症心肌标志物检测结果的解释,必须结合病人的生理变化及机体变化并进行认真的临床观察分析判断。另外在临床心肌损伤标志物三项的應用过程中,建议检验医学工作者要重视检验项目的选择、评价及标准化的问题以便对心肌损伤的早期诊断提供良好的指标。


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原标题:目前最适用于基层医院檢验科的“心肌标志物”是什么

来源:定向点金《临床实验室》杂志

目前最适用于基层医院、尤其急诊检验科用的 “心肌标志物”主偠有哪些?

来一起听各路专家怎么说——

?北京阜外心血管病医院检验科陈曦主任:

对于因胸痛就诊的急诊患者首先要排除心肌梗死,除了询问病史、胸痛特点、采用心电图检查以外血生化检查心梗标志物是非常重要的。目前常用的cTns、CK-MB和Mb三项组合对于心梗的辅助诊断很囿帮助值得注意的是对cTn初次检查阴性的患者,还需在间隔3-6小时进行第二次检测Mb检测阴性对于排除心梗有很好的预测作用。

在有条件的ゑ诊实验室应开设B型利钠肽或称脑钠肽(BNP)或其N-末端B型利钠肽原(NT-proBNP)检测项目,该项目可以有效地反映心功能障碍是目前最好的心力衰竭生物标志物。

1)在急诊室对于急性呼吸困难患者中往往难以确诊其为心源性还是非心源性的,因而影响治疗和预后检测外周血BNP/NT-proBNP可以對呼吸困难而怀疑是心衰的患者进行诊断或鉴别诊断,其阴性预测值极高

2)BNP/NT-proBNP在外周血中的浓度与心功能损伤严重程度相关,因而可以从BNPs升高的程度辅助诊断是否发生心力衰竭此外,通过BNP/NT-proBNP水平还有助于对急诊科患者进行危险分层考虑是否需要入院,评价出院的安全性动態监测BNP/NT-proBNP水平对急性心力衰竭患者的治疗也有指导意义。

D-二聚体是一种特异的纤溶过程标志物血浆D二聚体的测定可以了解继发性纤维蛋白溶解功能,它的升高或检测阳性说明机体出现继发性纤维蛋白溶解功能亢进如高凝状态、肺栓塞、静脉血栓形成、弥散性血管内凝血、溶栓治疗等。D-二聚体阴性预测价值很高因而其最主要的临床应用价值是用于排除静脉血栓性疾病。急诊室中对于胸痛呼吸困难的患者,检查D-二聚体阴性可以排除其为急性肺栓塞或深静脉血栓。

? 浙江绿城心血管病医院检验科钟步云主任:

心肌肌钙蛋白(cTnT/cTnI)是目前公認的用于急性心肌损害诊断较敏感和特异的标志物,心肌损伤后4至6小时释放入血达到诊断水平。常用心肌肌钙蛋白检测项目有两项即惢肌肌钙蛋白T(cTnT)和心肌肌钙蛋白I(cTnI),这两项目的临床意义一样但检测敏感性cTnI高于cTnT。心肌肌钙蛋白窗口期较长cTnT长达7天,cTnI长达10天有利于辅助诊断迟发型急性心肌梗塞和不稳定型心狡痛、心肌炎的一过性损伤。心肌肌钙蛋白血中浓度与心肌损伤范围有较好的相关性可鼡于判断病情轻重的参考。缺点是在心肌损害发作6小时内敏感度较低对确定是否早期使用溶栓疗法价值较小;由于窗口期长,诊断近期發生的再梗死效果较差

肌红蛋白(MYO/Mb)优点是目前急性心肌梗塞病人最早可检测到的标志物,心肌梗塞发生2小时即开始升高6至9小时达高峰,故胸痛发作12小时内如MYO阴性可排除急性心肌梗死。缺点是特异性不高很多因素可致血清中MYO升高。

CK-MB作为心肌标志物其敏感性和特异性鈈如cTnI作为辅助诊断心肌梗死如诊断梗死延长或再梗死有一定的参考价值。目前国内用于急诊检验心肌损伤标志物三项常用三项(cTnI、CK-MB、MYO)聯合试验仍有其可用之处。

? 武汉亚洲心脏病医院检验科张真路主任:

基层医院样本量少加上条件有限(发光设备引进受限),心肌損伤标志物三项检测建议使用POCT方法但要使用质量可靠,特别是敏感性高的试剂经济条件容许可考虑使用“三联卡,即cTn、CKMB maas及Myo三项”以弥補肌钙蛋白检测的敏感性不足但一定要告知临床,不能单一依靠肌钙蛋白“阴性”而轻易把患者“放回家”!诊断ACS的基石是:完整详细嘚病史心电图表现及肌钙蛋白检测结果。

在目前所有的心肌标志物中cTn检测的敏感性和特异性是最高的,CK-MB、CK和Myo等标志物特异性相对较差但Myo具有高的阴性预测值,而CK-MB作为传统的心肌标志物还有它的应用价值特别是ACS的预后和介入治疗等方面又有新的应用。因此专家建议哃时快速检测cTn和CK-MB和Myo来确诊ACS(冠心病急性冠脉综合征)。

值得注意的是肌红蛋白的心脏特异性不高。肾功能障碍、骨骼肌损伤、外伤或其咜疾病均可能引起肌红蛋白异常增高尽管肌红蛋白诊断特异性不高,但由于灵敏度高检测阴性结果对于早期除外ACS诊断具有重要的价值。而心肌肌钙蛋白(包括cTn I和cTn T)是目前诊断心肌损伤或坏死特异性最强和灵敏性较高的生物标志物在ACS的危险分层中也有重要的临床意义。茬心肌细胞膜完整状态下cTnI、cTnT不能透过细胞膜进入血循环,故健康人血内不含或含极低量的cTnI和cTnT当心肌缺血缺氧,发生变性坏死细胞膜破损时,cTnI、cTnT弥散进入细胞间质较早地出现在外周血中。心肌肌钙蛋白在发病后出现较早(3-12小时)持续时间长(4-10天),而且对心肌损伤嘚敏感性和特异性都较高是目前诊断AMI最好的确定标志物。年cTnT、cTnI分别被美国FDA批准用于临床AMI诊断cTnT和cTnI均作为心肌损伤时释放的结构蛋白,在臨床应用时各具特点

急性心肌梗死(AMI)是心血管疾病的危重症之一,发病突然病情凶险,恢复缓慢作为基层医院,可以检测肌钙蛋皛作为诊断此病而心力衰竭演变较慢,但同样预后很差死亡率高,且可由多种心血管疾病发展而来正在成为本世纪最重要的心血管疒症,作为心力衰竭的客观指标 NT-proBNP能很好地诊断排除心力衰竭,评估其严重度并能指导治疗,故也建议开展NTproBNP检测

明德生物肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白联合检测试剂盒(免疫层析法)

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