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原标题:二代测序有哪些技术简介

高通量测序技术(High-throughput Sequencing)是一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定又称下一代测序技术(Next-Generation Sequencing)、二代测序有哪些技术,其使得可对┅个物种的基因组和转录组进行深入、细致、全貌的分析所以又被称为深度测序(Deep Sequencing)。

第二代测序有哪些技术的核心思想是边合成边测序(Sequencing By Synthesis)即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列,现在广泛应用的二代测序有哪些仪供应商主要为Illumina和Life Tech(Thermo Scientific)

美国Illumina公司自2006年进军基因測序市场以来,陆续发布了HiSeq、MiSeq、NextSeq等一系列测序仪器

Illumina公司的各型号测序仪

测序方法采用边合成边测序的方法,基于专有的可逆终止化學反应原理测序时将基因组DNA的随机片段附着到光学透明的玻璃表面(即Flow cell),这些DNA片段经过延伸和桥式扩增后在Flow cell上形成了数以亿计Cluster,每個Cluster是具有数千份相同模板的单分子簇然后利用带荧光基团的四种特殊脱氧核糖核苷酸,通过可逆性终止的SBS(边合成边测序)技术对待测嘚模板DNA进行测序

美国Life Tech公司,现被Thermo Scientific(赛默飞)收购在2010年底推出了首款半导体测序仪Ion PGMTM,可配合使用不同的芯片满足不同的通量需求,随後又推出了Ion Proton平台

测序基于半导体测序原理。在半导体芯片上布满小孔每一个小孔就是一个测序反应池,当一个被单克隆序列覆盖的磁珠进入小孔后开始测序反应:按照顺序依次流经四种碱基,当发生碱基插入时便有H离子的释放,从而引起小池内的PH的变化PH的变化被反应池下面的感应器所感应,依次引起电势和电压的变化然后最终被转换为碱基信息。

? 测序原理简单-直接检测氢离子无需荧光检测

一天之内完成从样本制备到测序数据产生全部流程

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