【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与分离以尿素为氮源的微生物有关的问题：

，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。请用化学反应式表示这类细菌降解尿素的过程

（2）本实验需通过比较尿素固体培养基和LB固体培养基菌上的落数，了解土壤稀释液中能以尿素为氮源的微生物的比例，因此要用

（填方法）进行接种。配置培养基时选择琼脂糖作为凝固剂的原因是

。尿素溶液的灭菌选择的方法是

（3）已知氨与纳氏试剂反应生成淡红色络合物。为了定量测定所分离的微生物对尿素的降解能力，可选用液体培养基培养，并利用光电比色法测定培养液NH₃的含量。步骤如下：第一步，预实验。将培养液过滤和脱色处理后，用纳氏试剂显色处理。用光程为1cm的比色杯在570nm处测定

（A．增大光程，光波长不变B．增大光程，光波长增加C．减小光程，光波长不变D．减小光程，光波长增加）处再次测定，直到数据适宜为止。第二步，标准曲线的制作。用蒸馏水配制

，与茚三酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以氨浓度与光密度值的标准曲线。第三步，样品处理。将培养液过滤后，进行脱色处理，用纳氏试剂显色处理。第四步，样品测定与计算。
（二）回答与获得抗除草剂转基因玉米有关的问题：

（1）构建表达载体选择限制酶时，要求Ti质粒内每种限制酶只有一个切割位点，同时要求酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同，这个过程需用

。若除草剂抗性基因G含量较低，可以通过

得到大量目的基因。草剂抗性基因G和Ti质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是

（2）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带

插入受体细胞的核DNA。若核DNA中仅插入一个G基因，自交后代含G基因的植株中，纯合子占

（3）获得抗除草剂转基因玉米涉及到多次筛选，其中筛选含重组质粒的农杆菌应使用含

的选择培养基筛选出转化的愈伤组织，再诱导愈伤组织再生出抗除草剂转基因玉米。

【推荐2】（一）回答下列有关分离土壤中以尿素为氮源的微生物的实验：

逐步稀释，得到不同浓度的稀释液，取样时尽量只取

（填工具）进行灭菌，下列关于该灭菌操作的叙述错误的是

B.该工具灭菌后需用盐酸抽滤后直接干燥保存
C.其他培养基成分应用高压蒸汽法灭菌
D.菌液稀释、接种等均应在酒精灯火焰旁操作
（3）在合适的稀释倍数下，培养基中的红色透明圈直径大小不一，说明不同菌落的微生物可能是同一种菌的不同

，这种用于筛选高表达量微生物的方法称为

（4）若在10^-5浓度下培养皿的平均菌落数为13，则该1g土样中含分解尿素微生物的数量约为

（二）由于人—人杂交瘤技术存在杂交瘤细胞体外传代不稳定、抗体亲合力低等缺陷，目前单克隆抗体大多是鼠源性的，应用于人体治疗时存在诸多问题。科学家通过基因工程技术，可以最大程度降低抗体的鼠源性，降低甚至消除人体对抗体的排斥反应。回答下列问题
（1）从经过抗原免疫个体的

细胞中提取mRNA，通过

（2）为防止目的基因与质粒发生

，应使用不同种限制性核酸内切酶切割目的基因与质粒。用CaCl₂处理受体菌，使重组质粒更易导入，从而完成

（3）单克隆抗体比一般抗血清优越的原因是

（4）检测受体细胞是否合成抗体的方法是

；基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比，最突出的优点是

【推荐3】回答下列（一）（二）小题
（一）生物碱是玛卡（十字花科的一种植物）的有效成分之一。黑色玛卡被公认为效果最好的玛卡，产量极少，应用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：
（1）选用黑色玛卡营养芽进行组织培养时，需先将材料在

的乙醇中浸泡10分钟，再用5%次氯酸钠溶液浸泡以达到

（3）由于玛卡在生长过程中需要吸收土壤中大量的有机养分，因而每耕种过一季的土地，必须休耕6到7年，否则难以生长出好的玛卡来，这属于农业生产上的

（4）生物碱属于玛卡的

代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过

培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。
（二）浙江省部分村镇的农民率先建起了以沼气池为中心的生态工程。如图是某同学绘制的一个庭院生态工程示意图，分析并回答下列问题：

，是人类食物生产系统的两大支柱。庭院生态工程

（属于、不属于）农业生态工程。
（2）该生态系统中的生产者是

，构建这种以沼气池为中心的生态模式时所依据的最主要的生态学原理是

（3）生态农业是一个在生态上能自我维持的农业生产系统，其特点是在保持和改善系统内的生态平衡、不对其周围环境造成大的影响的情况下，求得最大生产力和可持续发展。下列关于生态农业的叙述不正确的是

A．生态农业中食物链的各营养级之间的能量传递效率大大提高了
B．生态农业比传统农业的自我调节能力强
C．生态农业设计时需要考虑社会效益、经济效益和生态效益
D．生态农业属于人工生态系统，对病虫害一般采用生物防治的方法
（4）为检测该庭院生态系统不同区域以尿素为氮源的微生物数量，需要配制尿素固体培养基，尿素溶液需用

过滤。有脲酶的细菌菌落周围会出现着色的环带，因为脲酶分解尿素产生氨气，使培养基中的